Skip to content

Как выбрать колонку для ВЭЖХ

Колонку для ВЭЖХ выбирают под методику: по фазе, размерам, частицам и условиям разделения. Разбираем, на что смотреть и как подобрать аналог, если нужной колонки нет.

Author: Гильмутдинов Тимур Фаритович

Published

Updated

7 min read

Начните с методики

Фармакопейные монографии описывают колонку не маркой, а типом сорбента по классификации USP, размерами и размером частиц. Например, L1 — октадецилсилан (C18) на пористом носителе, L7 — октилсилан (C8), L11 — фенильные группы. Это отправная точка: подходят колонки разных производителей с той же классификацией.

Ключевые параметры

Параметры колонки и на что они влияют
ПараметрНа что влияетТипичные значения
ФазаСелективность разделенияC18, C8, Phenyl, HILIC
ДлинаРазрешение и время анализа50, 100, 150, 250 мм
Внутренний диаметрРасход подвижной фазы и чувствительность2,1; 3,0; 4,6 мм
Размер частицЭффективность и давление5; 3,5; 2,7; 1,7 мкм
Размер порДоступ молекул к поверхности80–130 Å для малых молекул
Диапазон pHСтабильность сорбента2–8 для силикагеля, 1–12 для гибридных частиц

Размер частиц и давление

Мелкие частицы дают более узкие пики, но повышают давление. Колонки с частицами меньше 2 мкм требуют УВЭЖХ-систем. Поверхностно-пористые частицы около 2,7 мкм дают эффективность, близкую к УВЭЖХ, при давлении, доступном обычной ВЭЖХ-системе.

pH подвижной фазы и основные соединения

Классический силикагель стабилен примерно в диапазоне pH 2–8. Для работы при высоком pH выбирают колонки на гибридных частицах. Для основных соединений важны чистота силикагеля и эндкеппирование — они уменьшают взаимодействие с остаточными силанольными группами и хвосты пиков.

Как подобрать аналог

  • Сохраните классификацию USP, размеры и размер частиц
  • Сравните размер пор, плотность прививки и эндкеппирование
  • Учтите, что колонки одной классификации могут отличаться селективностью
  • После замены проверьте пригодность хроматографической системы по методике

Не забудьте предколонку

Предколонка с той же фазой задерживает загрязнения образца и продлевает срок службы аналитической колонки. Её меняют чаще, но она стоит заметно дешевле колонки.

Related

More articles